期刊简介

               本刊坚持“预防为主,面向基层,普及与提高相结合,推广国内外医学新技术、新成果、新经验、新动态,为疾病控制、预防保健事业发展服务”的办刊宗旨。                

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  • 杂志名称:实用预防医学杂志
  • 主管单位:中华人民共和国卫生部
  • 主办单位:中华预防医学会 湖南省预防医学会
  • 国际刊号:1006-3110
  • 国内刊号:43-1223/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖(01)期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
实用预防医学杂志2010年第03期

奈瑟氏淋球菌外膜蛋白PIA基因的克隆、真核表达与鉴定

熊新华;王华洪

关键词:奈瑟氏淋球菌, PIA, pcDNA3.1(+)/PIA, 表达
摘要:目的 克隆奈瑟氏淋球菌外膜蛋白PIA基因,构建稳定的真核重组表达载体,并在HELA细胞中表达.方法 根据淋球菌PIA基因序列,利用Primer Premier5.0生物学软件设计一对特异性扩增引物,以淋球菌国际标准株基因组DNA为模板,PCR扩增除掉信号肽后PIA基因开放读码框(ORF),将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+),构建含目的基因的pcDNA3.1(+)/PIA重组质粒,PCR及酶切鉴定重组载体,脂质体转染HELA细胞,以间接免疫荧光法检测PIA基因在HELA细胞中的表达. 结果 成功构建了pcDNA3.1(+)/PIA重组质粒;pcDNA3.1(+)/PIA能在HELA细胞中高效表达PIA蛋白. 结论 重组质粒pcDNA3.1(+)/PIA构建成功并在HELA细胞中高效表达了PIA蛋白,为该蛋白的抗原性及功能学研究奠定了基础.