期刊简介
本刊坚持“预防为主，面向基层，普及与提高相结合，推广国内外医学新技术、新成果、新经验、新动态，为疾病控制、预防保健事业发展服务”的办刊宗旨。
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首页>实用预防医学杂志
- 杂志名称：实用预防医学杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会 湖南省预防医学会
- 国际刊号：1006-3110
- 国内刊号：43-1223/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中华预防医学会系列杂志优秀期刊一等奖（01）期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组体的构建及其表达鉴定
刘志杰；邱宏；周秀萍；李秀萍
关键词：幽门螺杆菌, 真核表达重组体, Lpp20
摘要：目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)Lpp20基因的真核表达重组体,并鉴定其在Hela细胞中能否有效表达,为进一步开展Lpp20核酸疫苗与该蛋白的生物学功能的研究打下基础. 方法 抽提Hp标准菌株26695基因组DNA,应用聚合酶链式反应(PCR)技术从基因组DNA扩增Lpp20基因,经过一系列酶切、连接反应将其克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+),转人大肠杆菌,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应鉴定；用脂质体法将构建好的重组载体pcDNA3.1(+)- Lpp20转染Hela细胞,通过免疫细胞化学法及Western印迹法检测其在Hela细胞中表达的Lpp20蛋白. 结果 成功扩增出长约528bp的Lpp20基因,测序结果表明扩增出的Lpp20基因与HpLpp20序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实Lpp20基因正确克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+),并经免疫细胞化学法和Western印迹法检测到重组体可在Hela细胞中有效表达. 结论 成功构建了Lpp20基因的Hp真核表达重组体,并检测到其在Hela细胞中可表达出免疫反应性良好的蛋白,为进一步探索其免疫作用及生物学功能奠定了基础.
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